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用于懸浮/貼壁哺乳動物真核細胞的大容量核酸轉(zhuǎn)染儀
LONZA 4D-Nucleofector LV 大規(guī)模細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)（4D-Nucleofector LV Unit，簡稱LV模塊，或LV單元），是在傳統(tǒng)電穿孔技術的基礎上，針對每一種細胞，優(yōu)化電脈沖參數(shù)、轉(zhuǎn)染液，使細胞轉(zhuǎn)染效率、細胞活率得到顯著提升，解決了原代細胞、干細胞、T細胞等使用傳統(tǒng)電穿孔轉(zhuǎn)染效率低下的問題。
4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)技術（原德國Amaxa Nucleofection核轉(zhuǎn)染技術）對質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率高達90％，寡核苷酸（如siRNA）轉(zhuǎn)染效率高達99％，面世20年來，已成功轉(zhuǎn)染＞1200種細胞系、＞130種原代細胞，并在干細胞、免疫細胞、神經(jīng)細胞等各類較難轉(zhuǎn)染的細胞中獲得了優(yōu)秀的轉(zhuǎn)染效果。
同時，4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染可讓外源基因直接穿過核膜進入細胞核，不依賴細胞有絲，實現(xiàn)2小時快速表達。LONZA 4D-Nucleofector LV模塊可提供單次最高2×10^9個細胞、封閉、無菌的高效轉(zhuǎn)染，在人T細胞、CHO懸浮細胞、HEK23懸浮細胞、K562細胞等超過700種細胞中大量應用。
LONZA全球共享數(shù)據(jù)庫，包含超過1500種原代細胞、細胞系的轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)，提供包括細胞來源、傳代、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、到轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)技巧的成熟流程，讓研究者在海量數(shù)據(jù)支持中快速開展實驗，并取得成功。操作4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染設備時，只需一鍵調(diào)用LONZA內(nèi)置的轉(zhuǎn)染程序，即可實現(xiàn)細胞快速、高效轉(zhuǎn)染，而無需自行摸索轉(zhuǎn)染條件。
4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術優(yōu)勢
-采用高分子聚合物電極，避免傳統(tǒng)鋁電極的離子毒害，維持細胞生理狀態(tài)，提高存活率。
-轉(zhuǎn)染后可快速觀察實驗結(jié)果，例如轉(zhuǎn)染GFP后最快2小時可觀察到蛋白。
-無需自己優(yōu)化條件，擁有超過650種細胞類型的現(xiàn)成程序，可直接使用，全球共享數(shù)據(jù)庫，超過1500條轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)可供參考。
-可轉(zhuǎn)染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、肽、蛋白質(zhì)在內(nèi)的多種底物。
-可用于難以轉(zhuǎn)染的原代細胞、干細胞、神經(jīng)元、細胞系。
-靈活的轉(zhuǎn)染規(guī)�？s放，可在低、中、高通量中輕松轉(zhuǎn)移，實現(xiàn)2×10^4至1×10^9個細胞數(shù)量的輕松擴展。
-已在全球8000多家同行評議的出版物中發(fā)表。
LONZA 4D-Nucleofector LV大規(guī)模細胞核轉(zhuǎn)染儀，細胞治療基礎研究高效電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)
1、封閉、無菌的系統(tǒng)和耗材設計，滿足細胞治療基礎研究的需求。
2、20mL大容量，LV核轉(zhuǎn)儀提供單次1mL（最多1×10^8個細胞）的手動加樣、20×1mL（最多2×10^9個細胞）的自動加樣，快速高效。
3、符合cGMP要求，可使用符合美國FDA21 CFR part 11、歐盟Annex 11的軟件進行控制，適用于嚴格監(jiān)管的GMP實驗室。
①用戶管理（登陸，不同級別）
②具有用戶姓名與時間標記的電子簽名
③任何記錄的修改或是數(shù)據(jù)的創(chuàng)建均被記錄在案
④結(jié)果報告：失敗報告，以及詳細的問題描述
⑤可根據(jù)21CFR part11的要求導出數(shù)據(jù)（加密，預防）
⑥審計追蹤（使用記錄、更改記錄）
⑦無數(shù)據(jù)刪除可能
4、規(guī)模可簡單放大，在4D-Nucleofector X模塊（4D-Nucleofector X Unit，簡稱X模塊，或X單元）上進行的2×10^4細胞數(shù)量的優(yōu)化轉(zhuǎn)染方案，可直接在LV模塊上使用。
實驗數(shù)據(jù)：分別用4D-Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)儀X模塊（100μL）、LV模塊（1mL）向包括人T細胞、PBMC、293細胞、CHO細胞在內(nèi)多種代表性細胞中轉(zhuǎn)染pmaxGFP載體，實現(xiàn)轉(zhuǎn)染規(guī)模的線性放大。
參考文獻
1.Closed-system transposon-mediated manufacture of GMP grade CAR T-cells via the Lonza Nucleofector LV XL. LM Brownrigg,et al. ELSERIER(2020)
2.Biomimetic mineralized collagen scaffolds and their effect on osteogenic differentiation. L Luo,et al. ELSERIER(2020)
3.Optimization of clarification process for viral vectors. B Raghavan,et al. ELSERIER(2020)
4.Generation and testing of clinical-grade exosomes for pancreatic cancer. Mayela Mendt,et al. JCI Insight(2018)
5.Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies. BJ McCreedy,et al. ELSERIER(2018)
6.Unlocking the Potential of CRISPR-Based Gene Editing. Andrea Toell. Genetic Engineering & Biotechnology News(2017)
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