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Lonza (Amaxa) 4D-Nucleofector LV 大規(guī)模流式電穿孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)

——用于懸浮/貼壁哺乳動物真核細(xì)胞的大容量核酸轉(zhuǎn)染儀



4d-nucleofector LV 大規(guī)模細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)

 

Lonza 4D-Nucleofector LV 大規(guī)模流式電穿孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)4D-Nucleofector LV Unit,簡稱LV模塊,或LV單元),是在傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)的基礎(chǔ)上,針對每一種細(xì)胞,優(yōu)化電脈沖參數(shù)、轉(zhuǎn)染液,使細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞活率得到顯著提升,解決了原代細(xì)胞、干細(xì)胞、T細(xì)胞等使用傳統(tǒng)電穿孔轉(zhuǎn)染效率低下的問題。

4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)技術(shù)(原德國Amaxa Nucleofection核轉(zhuǎn)染技術(shù))對質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率高達(dá)90%,寡核苷酸(如siRNA)轉(zhuǎn)染效率高達(dá)99%,面世20年來,已成功轉(zhuǎn)染>1200種細(xì)胞系、>130種原代細(xì)胞,并在干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等各類較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞、以及外泌體電穿孔載藥獲得了優(yōu)秀的轉(zhuǎn)染效果。

同時,4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染可讓外源基因直接穿過核膜進入細(xì)胞核,不依賴細(xì)胞有絲,實現(xiàn)2小時快速表達(dá)。Lonza 4D-Nucleofector LV模塊可提供單次最高2×10^9個細(xì)胞、封閉、無菌的高效轉(zhuǎn)染,在人T細(xì)胞、CHO懸浮細(xì)胞、HEK23懸浮細(xì)胞、K562細(xì)胞等超過700種細(xì)胞中大量應(yīng)用。

Lonza全球共享數(shù)據(jù)庫,包含超過1500種原代細(xì)胞、細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù),提供包括細(xì)胞來源、傳代、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、到轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)技巧的成熟流程,讓研究者在海量數(shù)據(jù)支持中快速開展實驗,并取得成功。操作4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染設(shè)備時,只需一鍵調(diào)用Lonza內(nèi)置的轉(zhuǎn)染程序,即可實現(xiàn)細(xì)胞快速、高效轉(zhuǎn)染,而無需自行摸索轉(zhuǎn)染條件。

LONZA 4D-Nucleofector讓外源DNA直接入核

 

 

 

 


4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術(shù)優(yōu)勢

-采用高分子聚合物電極,避免傳統(tǒng)鋁電極的離子毒害,維持細(xì)胞生理狀態(tài),提高存活率。
-轉(zhuǎn)染后可快速觀察實驗結(jié)果,例如轉(zhuǎn)染GFP后最快2小時可觀察到蛋白。
-無需自己優(yōu)化條件,擁有超過759種細(xì)胞類型的現(xiàn)成程序,可直接使用,全球共享數(shù)據(jù)庫,超過1500條轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)可供參考。
-可轉(zhuǎn)染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、肽、蛋白質(zhì)、小分子化合物在內(nèi)的多種底物。
-可用于難以轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)元、細(xì)胞系,以及外泌體
-靈活的轉(zhuǎn)染規(guī)模縮放,可在低、中、高通量中輕松轉(zhuǎn)移,實現(xiàn)2×10^4至1×10^9個細(xì)胞數(shù)量的輕松擴展。
-全球發(fā)表文章超過14,000篇。


 

 


Lonza 4D-Nucleofector LV大規(guī)模細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀,細(xì)胞治療基礎(chǔ)研究高效電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)


1、封閉、無菌的系統(tǒng)和耗材設(shè)計,滿足細(xì)胞治療基礎(chǔ)研究的需求。
封閉無菌的lonza 4D-nucleofector LV核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)

 

 

 

2、20mL大容量,LV核轉(zhuǎn)儀提供單次1mL(最多1×10^8個細(xì)胞)的手動加樣、20×1mL(最多2×10^9個細(xì)胞)的自動加樣,快速高效。
4d-nucleofector LV電轉(zhuǎn)盤耗材

 

 

 

3、符合cGMP要求,可使用符合美國FDA21 CFR part 11、歐盟Annex 11的軟件進行控制,適用于嚴(yán)格監(jiān)管的GMP實驗室。

①用戶管理(登陸,不同級別)
②具有用戶姓名與時間標(biāo)記的電子簽名
③任何記錄的修改或是數(shù)據(jù)的創(chuàng)建均被記錄在案
④結(jié)果報告:失敗報告,以及詳細(xì)的問題描述
⑤可根據(jù)21CFR part11的要求導(dǎo)出數(shù)據(jù)(加密,預(yù)防)
⑥審計追蹤(使用記錄、更改記錄)
⑦無數(shù)據(jù)刪除可能


 

 

 

4、規(guī)?珊唵畏糯,在4D-Nucleofector X模塊(4D-Nucleofector X Unit,簡稱X模塊,或X單元)上進行的2×10^4細(xì)胞數(shù)量的優(yōu)化轉(zhuǎn)染方案,可直接在LV模塊上使用。
4d-nucleofector x單元轉(zhuǎn)染程序直接用于LV單元

 

 

實驗數(shù)據(jù):分別用4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)儀X模塊(100μL)、LV模塊(1mL)向包括人T細(xì)胞、PBMC、293細(xì)胞、CHO細(xì)胞在內(nèi)多種代表性細(xì)胞中轉(zhuǎn)染pmaxGFP載體,實現(xiàn)轉(zhuǎn)染規(guī)模的線性放大。

4d-nucleofector LV轉(zhuǎn)染效率


 

 

 

Lonza 4D-Nucleofector LV大規(guī)模流式核轉(zhuǎn)染系統(tǒng),基因治療研究的不二工具。

1、作為非病毒轉(zhuǎn)染技術(shù),適用于不同的基因編輯系統(tǒng),如鋅指核酸酶(ZFN)、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)。
2、可轉(zhuǎn)染多種不同的底物,如DNA、mRNA、蛋白(如Cas9 RNP),由于轉(zhuǎn)染條件相同,可進行不同底物的簡單共轉(zhuǎn)染。
3、常用于應(yīng)用iPS、CD34+造血干細(xì)胞、T細(xì)胞的穩(wěn)定修飾。
4、技術(shù)成熟可靠,有≥80本相關(guān)出版物刊載,眾多領(lǐng)域的知名學(xué)者正在使用4D-Nucleofector技術(shù),全球發(fā)表文章超過14,000篇,并持續(xù)不斷增加中!

Lonza 4D-Nucleofector大規(guī)模流式核轉(zhuǎn)染系統(tǒng),作為轉(zhuǎn)染人原代T細(xì)胞的強大方法,與CRISPR和其他基因編輯技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用,已成為基因治療基礎(chǔ)研究的理想工具。

 



 

4D-Nucleofector LV核轉(zhuǎn)儀參數(shù)

 

品牌 瑞士Lonza龍沙
產(chǎn)地 德國科隆
名稱 4D-Nucleofector LV大規(guī)模流式細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)
型號 LV
貨號 AAF-1003B Core模塊,必買程序模塊
AAF-1002L LV模塊
用途 用于干細(xì)胞、原代細(xì)胞、細(xì)胞系的大規(guī)模高效轉(zhuǎn)染
適用細(xì)胞 哺乳動物懸浮細(xì)胞,貼壁細(xì)胞(消化后),包括難轉(zhuǎn)染的血液系統(tǒng)細(xì)胞和干細(xì)胞
轉(zhuǎn)染物 質(zhì)粒、RNA、蛋白質(zhì)、小分子化合物等
銷售授權(quán) 中國大陸一級代理(不含港澳臺)
價格 詢價
貨期 國內(nèi)現(xiàn)貨1周(如無現(xiàn)貨則為4-6周)
服務(wù) 售前技術(shù)咨詢,裝機,售后服務(wù)(售后限北京澤平銷售儀器)


注:常用模塊組合參考:C+X+LV,X模塊用于小規(guī)模優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,LV模塊用于大規(guī)模轉(zhuǎn)染。

 

 


 

參考文獻

1.Closed-system transposon-mediated manufacture of GMP grade CAR T-cells via the Lonza Nucleofector LV XL.  LM Brownrigg,et al. ELSERIER(2020)
2.Biomimetic mineralized collagen scaffolds and their effect on osteogenic differentiation. L Luo,et al. ELSERIER(2020)
3.Optimization of clarification process for viral vectors. B Raghavan,et al. ELSERIER(2020)
4.Generation and testing of clinical-grade exosomes for pancreatic cancer. Mayela Mendt,et al. JCI Insight(2018)
5.Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies. BJ McCreedy,et al. ELSERIER(2018)
6.Unlocking the Potential of CRISPR-Based Gene Editing. Andrea Toell. Genetic Engineering & Biotechnology News(2017)


 

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