1、儀器具體介紹:
4D細胞核轉染系統(tǒng)模塊化設計,由Core unit(核心單元),和X unit(X功能單元),和/或Y unit(Y功能單元)等功能單元組成,每個功能單元適合于不同的應用需求。
型號:4D
廠家:德國Lonza公司
組成:- Core unit(核心單元:為4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)提供脈沖;
- X unit(X單元):支持不同規(guī)格、不同細胞數(shù)的轉染平臺;適用于在 16-孔貼壁電轉板條中的原位貼壁轉染;
- Y unit(Y單元)——提供24-孔細胞培養(yǎng)板中的原位貼壁核轉染平臺
功能搭配:
- 核心單元和各功能單元可以平行拼接或疊放;
- 靈活地選擇和組裝4D細胞核轉染系統(tǒng);
- 可操控軟件:實驗者根據(jù)實驗需求,可以自己設計和存儲實驗設置;
- USB接口與電腦連接:軟件升級和數(shù)據(jù)傳送,如實驗者可以通過電腦預先定義實驗設置;
- 可接駁96孔shuttle轉染儀
2、配套轉染試劑盒:
4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)采用導電性聚合物,取代了金屬鋁離子,保證高效轉染的同時獲得高的細胞存活率。
技術專利
專利的導電性聚合物電轉杯和電轉板條
- 專利的導電性聚合物材料替代傳統(tǒng)的金屬鋁離子電極
- 克服傳統(tǒng)金屬電極釋放的金屬離子(Al3+對細胞的毒性)對轉染效果的影響。
- 提高(或維持)轉染效率的同時,保證細胞的生理特性。
- 規(guī)格:單孔電轉杯(100μl)/16孔電轉板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
品種:
X功能單元核轉染試劑盒
- 3種細胞系轉染試劑盒:SE, SG, SF電轉液;
- 5種原代細胞轉染試劑盒:P1, P2, P3, P4, P5電轉液
- 2種優(yōu)化轉染試劑盒
Y功能單元原位貼壁核轉染試劑盒
- 原位貼壁核轉染試劑盒AD1:神經(jīng)元原位貼壁轉染;
- 原位貼壁核轉染試劑盒AD2
種類:
組成:
- 細胞特異性核轉染液
- 添加劑
- pmaxGFP陽性質粒
- 單孔電轉杯(100μl)/16孔電轉板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
- 塑料吸管(與單孔電轉杯配套)
規(guī)格:多種規(guī)格,如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等
3、原位核轉染技術:“原位核轉染技術”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術只能在細胞懸液中轉染的缺陷,實現(xiàn)了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉染的核轉染。
2010年,Lonza推出了4D系統(tǒng),其中利用X unit的16孔電轉板條,推出了第一個原位核轉染試劑盒;
2010年,Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉染試劑盒——96孔電轉板條。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉染。
“All-in-one” Process——細胞培養(yǎng)、轉染、觀察和分析都在同一細胞培養(yǎng)板中或電轉板中實現(xiàn)。
分離后的原代神經(jīng)元直接接種到鋪有多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中或電轉板條中。神經(jīng)元細胞能貼壁培養(yǎng)多達14d,并在培養(yǎng)過程的任何時間點進行轉染或多次轉染。
優(yōu)勢:
– 可在神經(jīng)元貼壁生長的任何階段進行原位核轉染或多次進行原位核轉染
– 原位轉染前、中、后,神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中,維持貼壁生長的生理狀態(tài)
– 唯一轉染效率最高可達70%的非病毒轉染方法
– 整個過程維持了細胞功能
– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析
(1)、24孔細胞培養(yǎng)板中貼壁細胞的原位核轉染技術:4D細胞核轉染系統(tǒng)-Y功能單元
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